【摘 要】
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旨在构建变异猪流行性腹泻病毒（PEDV）的M和N双基因融合质粒,并分析表达蛋白免疫原性。通过扩增变异PEDV FJFQ2014毒株（GenBank登陆号KJ646580）的M基因和N基因,将M基因克隆至pEASY
【机 构】
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福建省农业科学院畜牧兽医研究所/福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心
【基金项目】
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公益类科研院所专项（2018R1023-4）,公益类科研院所专项（2017R1023-8）, 福建省自然科学基金项目（2015J01112）
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旨在构建变异猪流行性腹泻病毒（PEDV）的M和N双基因融合质粒,并分析表达蛋白免疫原性。通过扩增变异PEDV FJFQ2014毒株（GenBank登陆号KJ646580）的M基因和N基因,将M基因克隆至pEASY-Blunt E2（pE2）表达载体,构建出pE2-M质粒。利用同源重组原理,采用无缝拼接试剂盒将N基因克隆至E2-M片段,转化到Trans 1-T1感受态细胞中,构建出pE2-M-N融合双基因质粒并转化Transetta（DE3）,表达出相应的融合蛋白,采用SDS-PAGE和Western bl
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