【摘 要】
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目的:优化中性红法检测巨噬细胞(Mφ)吞噬功能的实验条件,为快速筛选Mφ吞噬功能调节成分提供更为稳定的细胞模型。方法:以小鼠腹腔Mφ吞噬中性红的能力作为模型检测指标,考
【机 构】
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贵阳中医学院,贵阳中医学院2006级研究生,贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室
【基金项目】
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贵州省中医药管理局重点项目(黔中医药科教发[2006]59号)
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目的:优化中性红法检测巨噬细胞(Mφ)吞噬功能的实验条件,为快速筛选Mφ吞噬功能调节成分提供更为稳定的细胞模型。方法:以小鼠腹腔Mφ吞噬中性红的能力作为模型检测指标,考察细胞收集方法、细胞浓度、贴壁孵育时间、培养时间、LPS浓度、中性红浓度、检测波长等因素对检测结果的影响,优化中性红法检测Mφ吞噬功能的实验条件。结果:本实验条件下,PBS等三种清洗液收集小鼠腹腔Mφ的效率没有显著性差异(P>0.05);Mφ贴壁孵育时间以3h为宜;Mφ加样浓度可选择在2~8×106/ml范围内;LPS在30μg/ml时达到最佳刺激效应;中性红浓度选择0.09%能够满足检测要求;加入中性红后的反应时间以3h的OD值最高:检测波长以520nm时OD值最高。结论:优化中性红法检测Mφ吞噬功能,对快速筛选Mφ吞噬功能调节成分具有实用价值。
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