【摘 要】
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目的 探讨丙戊酸钠(VPA)诱导乳腺癌细胞凋亡的作用.方法 乳腺癌细胞株MCF-7细胞分为0.75～4.0 mmol/L VPA实验组、对照组(不加VPA)及VPA与caspase抑制剂共同作用组.Annexin V-PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡,间接免疫荧光法定量分析及分光光度法检测caspase-3、caspase-8、caspase-9蛋白丰度和活性,探讨VPA诱导凋亡的机制,同时检测V
【机 构】
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目的 探讨丙戊酸钠(VPA)诱导乳腺癌细胞凋亡的作用.方法 乳腺癌细胞株MCF-7细胞分为0.75～4.0 mmol/L VPA实验组、对照组(不加VPA)及VPA与caspase抑制剂共同作用组.Annexin V-PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡,间接免疫荧光法定量分析及分光光度法检测caspase-3、caspase-8、caspase-9蛋白丰度和活性,探讨VPA诱导凋亡的机制,同时检测VPA与caspase-3、caspase-8、caspase-9特异性抑制剂协同作用后细胞凋亡的变化来加以验证.结果 各浓度VPA干预MCF-7细胞48 h后,细胞凋亡率显著增加,caspase-3、caspase-9活性升高、蛋白表达明显上调,与对照组相比有显著差异(F=552.1、610.9、312.8、222.8、70.3,均P＜0.001);而caspase-8活性及蛋白表达未见明显改变;1.5、3.0 mmol/L VPA与caspase-3、caspase-9相应特异性抑制剂共同作用组,细胞凋亡率均较VPA组显著降低(t=109.0、28.7、18.7、32.3,均P＜0.005);VPA与caspase-8特异性抑制剂共同作用组细胞凋亡率与VPA组比较无明显改变(t=1.03、2.32,均P＞0.05).结论 VPA可通过激活caspase-9介导的内源性凋亡途径,明显诱导乳腺癌细胞凋亡,具有较好的临床应用价值。
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