猪α1-干扰素的基因改造与高效原核表达

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poIFN-α1基因中含有大量的大肠杆菌稀有密码子,为了获得高表达,使用了大肠杆菌的偏爱密码子,人工合成了poIFN-α1成熟蛋白编码基因.在保留编码蛋白序列的同时,使其5′端A+T的含量增加到最大限度,并将其终止密码子改为TAA.将合成的poIFN-α1成熟蛋白编码基因插入原核单纯表达载体pRLC中,转化大肠杆菌DH5α.实现了poIFN-α1在大肠杆菌中的高效表达,表达产物以包涵体形式存在.纯化的包涵体经含DTT的6 mol/L盐酸胍的变性液溶解及含GSH-GSSG的复性液复性处理,复性后的表达产物浓
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