【摘 要】
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目的应用TAP系统分离纯化的MT1-MMP-hTAP蛋白复合物的表达效应.方法应用TAP系统分子生物学特性采用IgG和钙调蛋白亲和胶粒二次亲和层析法分离纯化MT1-MMP-hTAP蛋白复合物.PAP
【机 构】
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第三军医大学西南医院妇产科,Bone and Joint Center
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目的应用TAP系统分离纯化的MT1-MMP-hTAP蛋白复合物的表达效应.方法应用TAP系统分子生物学特性采用IgG和钙调蛋白亲和胶粒二次亲和层析法分离纯化MT1-MMP-hTAP蛋白复合物.PAP免疫染色及Western blot法检测蛋白表达效应.结果 PAP免疫染色显示MT1-MMP-hTAP融合基因在鸡成纤维细胞内有效表达,融合蛋白染色呈深蓝色,Western blot法检测经TAP系统分离纯化后MT1-MMP-hTAP蛋白复合物分子稳定表达在相应68×103位置.结论 TAP系统分离纯化MT1-MMP-hTAP蛋白复合物及其在动物细胞的构建成功并有效表达为在人类肿瘤细胞建立TAP纯化蛋白质体系和寻找MT1-MMP-hTAP相互作用蛋白提供了方法学支持.
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