【摘 要】
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目的 研究人支气管上皮(HBE)细胞内5-脂氧合酶(5-LOX)对联苯胺(BZD)的氧化代谢,为LOX作为细胞色素P450氧化代谢外源化合物的替代途径提供进一步的依据.方法 体外酶系统实验:BZD在含有大豆脂氧合酶(SLO)的酶体系中反应,用分光光度法检测体系中反应产物.细胞实验:HBE细胞染毒24h(BZO剂量分别为100、200、500μmol/L,AA861剂量分别为0.3、3.0、30.0
【机 构】
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410078,长沙,中南大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学系，深圳市宝安区大浪卫生监督所,410078,长沙,中南大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学系,410078,长沙,中南大学公共卫生学院劳动
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目的 研究人支气管上皮(HBE)细胞内5-脂氧合酶(5-LOX)对联苯胺(BZD)的氧化代谢,为LOX作为细胞色素P450氧化代谢外源化合物的替代途径提供进一步的依据.方法 体外酶系统实验:BZD在含有大豆脂氧合酶(SLO)的酶体系中反应,用分光光度法检测体系中反应产物.细胞实验:HBE细胞染毒24h(BZO剂量分别为100、200、500μmol/L,AA861剂量分别为0.3、3.0、30.0 μmol/L),用Western-blot检测5-LOX蛋白表达;用单细胞凝胶电泳检测DNA损伤.同时,检测特异性5-LOX抑制剂(AA861)对5-LOX蛋白表达和对DNA损伤的影响.结果 在过氧化氢参与下,SLO可以介导BZD氧化生成二亚胺联苯胺.最大反应速度(Vmax)值为1.42 nmol/(min·nmol)SLO,BZD的米氏常数(Km)值为1.48 mmol/L.LOX抑制剂上甲二氢愈创木酸可抑制该协同氧化作用.BZD可以使HBE细胞5-LOX蛋白表达增加,AA861对5-LOX蛋白表达无影响;BZO可以使HBE细胞产生明显的DNA损伤,AA861可以明显抑制BZD所致的DNA损伤,且有剂量-效应关系.结论 5-LOX在HBE细胞内的蛋白表达可以受BZD的影响.HBE细胞的5-LOX可能通过介导BZD协同氧化,产生亲电子白南基,而与DNA结合,使HBE细胞产生DNA损伤,这可能是BZD致癌的机制之一;AA861可以明显抑制这种作用。
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