二甲双胍对脂肪前体细胞增殖和分化的影响

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目的研究不同浓度二甲双胍对3T3-L1脂肪前体细胞的增殖和分化的影响。方法将体外培养的3T3-L1脂肪前体细胞用不同浓度的二甲双胍处理。分别采用倒置显微镜观察细胞形态、MTT法、油红0染色法、酶标仪测量光密度值等方法研究不同浓度二甲双胍对3T3-L1脂肪前体细胞增殖、分化的影响。结果在镜下观察3T3-L1脂肪前体细胞细胞贴壁后呈成纤维细胞样,当二甲双胍组浓度较低(≤0.5 mmol/L)时,其细胞的形态、密度、各组光密度值无明显差异,当二甲双胍组浓度较高(≥5 mmol/L)时,细胞出现变形、破坏,甚至形成凋亡小体,细胞数量也减少,各组光密度值存在统计学差异。油红0染色后显微镜下观察细胞的形态,阴性对照组细胞呈成椭圆形或梭形;阳性对照组、二甲双胍浓度较低(≤0.5 mmol/L)组可见80%~90%的细胞向脂肪细胞分化,细胞内见大量脂滴聚积,油红0染色明显着色,其光密度值与阴性对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),与阳性对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。二甲双胍浓度为5 mmol/L组脂肪细胞表型数量、油红0染色着色较对照组显著减少,其光密度值与阳性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论二甲双胍浓度较低(≤0.5 mmol/L)时对3T3-L1脂肪前体细胞增殖无影响;二甲双胍浓度较高(≥5 mmol/L)时3T3-L1脂肪前体细胞的增殖可明显被抑制,且随着药物的浓度增加抑制作用增强;二甲双胍浓度较高(≥5 mmol/L)可能促进3T3-L1脂肪前体细胞的凋亡。低浓度的二甲双胍(≤0.5 mmol/L)对3T3-L1脂肪前体细胞的分化无影响;3T3-L1脂肪前体细胞的分化可被5 mmol/L的二甲双胍抑制。
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