用Genome shuffling技术选育紫杉醇高产菌株

来源 :中国科学(C辑:生命科学) | 被引量 : 23次 | 上传用户:yuany06
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以树状多节孢(Nodulisporium sylviforme)紫杉醇产生菌为研究对象,探索了紫杉醇产生菌的基因组重排育种的基本规律,重点研究了紫杉醇产生菌的原生质体融合和基因组重排育种的方法.采用薄层层析(TLC)、高效液相色谱(HPLC)和质谱(MS)分析筛选重组子,通过四轮基因组重排成功选育出了3株遗传稳定的高产紫杉醇菌株,其中一株重排菌株F4-26的发酵液中紫杉醇含量达到516.37μg/L,比原始出发菌株NCEU-1紫杉醇产量提高了64.41%,比亲本菌株紫杉醇产量提高了31.52%~44
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转录因子GATA家族含有6个成员,分别为GATA1~6,本实验主要针对GATA-2与CREB结合蛋白(CBP)的关系进行了研究.GATA-2主要在造血祖细胞中表达,对维持这类细胞的非分化状态有重要作用.CBP是多种可调控的与DNA结合的转录因子的辅激活因子,其中包括转录因子GATA-1.目前尚未有报道表明CBP蛋白也是GATA-2的辅激活因子.本研究利用免疫沉淀技术和洗脱技术证明了小鼠的GATA-
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应用荧光原位杂交技术对家蚕单拷贝的丝胶基因1(Ser-1)及胰凝乳蛋白酶抑制因子13基因(CI-13)进行了分子细胞遗传学的染色体定位.结果表明:Ser-1位于第11连锁群染色体的近端部位置,在粗线期染色体上的相对位置为12.5±1.4;CI-13位于第2连锁群染色体的近端部,在粗线期染色体上的相对位置为8.2±1.2,进而绘制了上述基因在家蚕染色体上的位置模式图—FISH图,并对家蚕染色体的荧光
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通过在清醒小鼠(Mus musculus)大脑同步记录海马区单神经元放电和场电位,发现在海马CA1区存在两类与慢波睡眠时海马特征场电位"ripple"高频振荡(100~250Hz)相关的高频放电中间神经元.这两类神经元在慢波睡眠时的放电与ripple在时间上有高度同步性,对应每个ripple振荡波,它们都有一串高频放电.其中一类中间神经元(类型Ⅰ)在一个ripple振荡波的每个子振荡周期基本有1个
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ST0838(定义为stRad55B)是超嗜热古菌(Sulfolobus tokodaii)编码的4个RadA的同系物(或Rad55同源蛋白)之一.研究发现,它能够被紫外线(UV)辐射损伤诱导,可能参与了细胞内的DNA损伤修复过程,然而利用常规方法,该蛋白不能体外可溶性地表达.通过和RadA共表达,得到了具有热稳定性的可溶stRad55B蛋白,并对其活性进行了初步检测.stRad55B优先结合单链
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对红色原鸡(Gallus gallus)和中国家鸡(Gallus domesticus)之间的遗传多样性和亲缘关系进行系统分析,可以为中国家鸡的起源进化、种质资源保护以及科学开发利用等研究提供理论依据,但迄今尚未见用微卫星标记进行分析比较的公开报道.本研究利用29对微卫星引物对红色原鸡Gallus gallus spadiceus亚种和Gallus gallus gallus亚种以及14个中国家鸡
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本文中嗜热脂肪芽孢杆菌(B.stearothermophilus)的高温中性蛋白酶基因在sacB基因启动子的调控下,以蛋白酶自身或sacB基因的序列为信号肽,分别实现了在枯草芽孢杆菌DB104中的高效表达.表达产物经纯化后,酶的比活力可达16530U/mg,纯化倍数达到3.8倍,分子量约为35kD.对酶学性质的研究结果表明,此酶的最适反应温度为65℃,最适作用pH为7.5,在65℃下反应1h后,仍
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植物种子的发育和萌发受严格的时空调控,其中转录因子起着重要的作用.本研究发现了一条在发育过程中的大豆种子里特异表达的表达序列标签(expressed sequence tag,EST).通过末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA end,RACE)得到该基因的全长序列并命名为GmSGR.序列分析表明该基因属于AP2/ERF类转录因子家族,其AP2结构域与拟南芥(A
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水稻OsEBP-89基因的表达受乙烯(ET)、脱落酸(ABA)、茉莉素等激素和干旱、低温等逆境胁迫处理的诱导.本研究中,克隆该基因启动子和预测应答胁迫与激素信号相关顺式作用元件的基础上,通过农杆菌注射法介导的瞬时表达证实了该启动子在烟草叶片中驱动GUS报告基因的表达受茉莉素的诱导.为了进一步确定该启动子中应答茉莉素信号的重要DNA区域,对该启动子进行了一系列的缺失突变,并将相关的缺失启动子片段与G
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