猪伪狂犬病毒囊膜糖蛋白gB主要抗原表位区基因的克隆及原核表达

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参照GenBank发表的猪伪狂犬病毒囊膜糖蛋白gB主要抗原表位的编码区基因序列,设计一对引物,通过PCR扩增后,将约为600bp的目的片段克隆到pGEM—T载体上,酶切后插入原核表达载体pET-32(a)的T7启动子下游,构建的重组质粒pET—gB经IPTG诱导,在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了高效表达。SDS-PAGE结果显示,表达产物分子量约为42.4KDa,主要以包涵体形式存在。BandScan分析表明,表达量约占菌体蛋白的60.5%。利用HiS亲和层析方法得到了纯化的表达产物。Western
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