牛朊蛋白27-30基因的克隆与表达

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wangyuange

【摘要】

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利用PCR技术，从含有牛朊蛋白（Prion protein，PrP）基因Prnp的开放阅读框的克隆质粒BoPrnp—T中扩增出约420bp的目的基因（PrP猢基因）。将PrP^27-30基因和载体pPIC9K分别用限制性核酸

【作者】

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路伟张鹏张杰刘永生卫广森陈豪泰姜海霞朱小玲

【机构】

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中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室／农业部畜禽病毒学重点开放实验室,沈阳农业大学,甘肃农业大学动物医学院,辽宁省动物疫病预防控制中心

【出处】

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中国预防兽医学报

【发表日期】

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2007年4期

【关键词】

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牛PrP^27-30基因克隆表达 bovine PrP^27-30 gene cloning expression

【基金项目】

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甘肃省科技攻关重点项目（2GS042-A41-001-09）,甘肃省自然科学基金暨中青年科技基金项目（3ZS051-A25-065）,国家博士后科学基金（20040350585）

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利用PCR技术，从含有牛朊蛋白（Prion protein，PrP）基因Prnp的开放阅读框的克隆质粒BoPrnp—T中扩增出约420bp的目的基因（PrP猢基因）。将PrP^27-30基因和载体pPIC9K分别用限制性核酸内切酶EcoRⅠ和NotⅠ进行双酶切，T4DNA连接酶作用后，转化至E．coli JM109中，构建重组表达载体pPIC9K-boPrP^27-30。pPIC9K-boPrP^27-30经限制性核酸内切酶SalⅠ线性化后电转至毕赤酵母GS115中，经G418筛选后得到高拷贝的重组菌株G

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