背景与目的阿奇霉素为大环内酯抗生素,曾被报道可抑制肿瘤细胞增殖。然而,其潜在机制尚未完全阐明。肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF?related apoptosis inducing ligand,TRAIL)选择性地靶向肿瘤细胞而不损伤健康细胞。在本研究中,我们研究阿奇霉素是否与TRAIL协同作用,如果有相互作用,进一步探究其在结肠癌中的潜在机制。方法对HCT?116、SW480、SW620和DiFi细胞进行阿奇霉素给药处理,纯化TRAIL或它们的结合物。采用磺酰罗丹明B实验检测细胞存活。凋亡检测采用了annexin V?FITC/PI染色法,自噬则通过吖啶橙染色法检测。Western blot分析用于检测蛋白表达水平。在机制实验中,siRNA用于敲低死亡受体(DR4、DR5)和LC?3B。利用携带HCT?116异种移植瘤的BALB/c裸鼠进行了阿奇霉素和TRAIL联合抗癌作用的检测。结果阿奇霉素剂量依赖性地抑制HCT?116和SW480细胞的增殖。阿奇霉素和TRAIL联合抑制肿瘤生长的行为不能通过叠加效应解释。阿奇霉素提高了DR4、DR5、p62和LC?3B蛋白的表达水平,增强了TRAIL诱导凋亡。siRNA敲低DR4和DR5后提高了细胞存活率,降低了阿奇霉素和TRAIL联合诱导的cleaved?PARP的表达。LC?3B siRNA和Chloroquine(CQ)增强了TRAIL单独的抗增殖活性,提高了DR4和DR5的表达。结论阿奇霉素和TRAIL的协同抗肿瘤作用主要依赖于DR4和DR5的上调,而这是LC?3B相关自噬抑制的结果。