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目的：构建水蛭素毕赤酵母表达载体，获得重组蛋白在毕赤酵母中的分泌型表达．方法：通过PCR扩增获得水蛭素HV2，HV2-N47K基因，将序列正确的基因序列插入酵母表达载体pPIC9α分泌信号下游，再亚克隆入高拷贝载体pPIC9K，构建表达质粒pPIC9K-HV2，pPIC9K-HV2-N47K．重组质粒转化宿主菌GSM1168，G418抗性筛选高拷贝的稳定表达菌株，经甲醇诱导表达并对表达产物进行鉴定．结果：成功构建了水蛭素毕赤酵母表达载体，获得水蛭素在毕赤酵母中的分泌型表达，表达产物具有抗凝血酶活性．结论：