【摘 要】
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目的:建立灵敏、特异和稳定的人可溶性CD40(sCD40)酶标检测试剂盒及探讨其检测的临床意义.方法:采用该室制备的鼠抗人CD40单抗5C11作为包被抗体,另一株识别不同抗原位点的单
【机 构】
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苏州大学医学生物技术研究所,Lab.de Technologie Cellulaire
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目的:建立灵敏、特异和稳定的人可溶性CD40(sCD40)酶标检测试剂盒及探讨其检测的临床意义.方法:采用该室制备的鼠抗人CD40单抗5C11作为包被抗体,另一株识别不同抗原位点的单抗3G3经生物素(biotin)标记后作为检测抗体,建立双单抗夹心的人sCD40酶标检测方法和对各种质控参数进行优化.在此基础上测定了健康供血员、甲亢、慢性肾炎、白血病、类风湿性关节炎患者的血清、肺癌患者血清和胸水及多种多发性骨髓瘤(MM)、淋巴瘤细胞株培养上清中sCD40的含量.结果:成功地研制了人sCD40酶联检测试剂盒,其灵敏度为15.6 pg/ml.该试剂盒4℃放置3个月,离散度(CV)＜±7.9%,回收率为95%～114%,提示检测方法具有良好的灵敏度、稳定性和准确性.用该试剂盒测得血清中sCD40含量的95%正常值范围(x±s)为105.00±18.88 pg/ml,甲亢、慢性肾炎、白血病、类风湿患者的血清、肺癌患者血清和胸水中sCD40的含量明显高于正常对照组(P＜0.01).结论:成功地研制了检测人sCD40酶标检测试剂盒,对一些与CD40分子表达或信号异常的疾病患者外周血检测结果显示,该试剂盒在临床检测中具有潜在的应用价值.
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