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目的
观察CXC趋化因子受体4(CXCR4)对人胆囊癌细胞株GBC-SD增殖的影响。
方法分别用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)、Western blot、流式细胞术等方法检测CXCR4在GBC-SD细胞及人脐静脉内皮细胞株ECV-304中m RNA、蛋白以及细胞表面分子的表达;设计CXCR4靶向短发卡RNA(shRNA),并构建到pSilencer TM 2.1-U6质粒中,转染GBC-SD细胞,噻唑蓝比色法(MTT)检测GBC-SD细胞增殖。
结果与ECV-304细胞比较,GBC-SD细胞中CXCR4 m RNA和蛋白呈明显阳性表达,而细胞表面CXCR4分子的表达也明显增高[(70.30±3.50)% 与(0.76±0.11)%];与对照组GBC-SD细胞比较,转染了pSilencer TM 2.1-U6-CXCR4 sh RNA质粒的GBC-SD细胞,其CXCR4 m RNA未见明显条带,蛋白表达亦明显降低,MTT结果显示干扰CXCR4 120 h后,GBC-SD细胞吸光度值较未转染组细胞明显降低(3.19±0.16与1.63±0.23)。
结论抑制CXCR4表达可抑制胆囊癌细胞生长。