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目的：研究DNA低甲基化对穿孔素基因mRNA和蛋白表达的影响。方法：密度梯度离心分离正常成人的外周血淋巴细胞，磁珠分离CD4和CD8细胞后进行细胞培养，DNA甲基化抑制剂5-杂氮胞苷（5-azaC）处理。分别提取DNA、RNA和蛋白质。亚硫酸氢钠处理DNA，巢式PCR进行扩增、转化入大肠杆菌，挑取克隆测序。实时定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测穿孔素mRNA的表达，Western印迹检测穿孔素蛋白量的变化。结果：5-azaC处理后的CD4细胞和CD8细胞穿孔素mRNA和蛋白表达显著高于未处理的CD