一种改进的固相扣除杂交法直接克隆全长差异表达基因

来源 :北京林业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:khsim
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该文集多种分离差异表达基因方法的优点于一体,自行优化了一种基于固相扣除杂交和聚合酶链式反应(PCR)技术直接克隆全长差异表达基因的策略。该策略中的所有操作步骤,包括poly(A)+mRNA的分离,cDNA的合成和扣除杂交都是在磁珠上进行的,操作简单易行。扣除杂交是用结合在磁珠上的以oligo(dT)为引物合成的对照材料(Driver)的cDNA第一链,直接扣除加有接头的处理材料(Tester)cDNA第二链中的共有序列。多次反复使用Driver一链与Tester二链进行杂交,能有效去除Tester二链中的
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