【摘 要】
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以酿酒酵母单倍体CE N.PK1与双倍体CEN.PK2为研究对象,利用改良热酚法,快速高效地提取酿酒酵母总RNA。结果显示应用该方法提取的酿酒酵母CEN.PK1和CEN.PK2的总RNA经分光光度
【机 构】
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东北农业大学生命科学学院,中国农业科学院作物科学研究所中国农业科学院生物质能源研究中心
【基金项目】
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中国农业科学院作物科学研究所中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资助项目(2060302-13)
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以酿酒酵母单倍体CE N.PK1与双倍体CEN.PK2为研究对象,利用改良热酚法,快速高效地提取酿酒酵母总RNA。结果显示应用该方法提取的酿酒酵母CEN.PK1和CEN.PK2的总RNA经分光光度计测定浓度为7.63μg/μL和3.77μg/μL,OD260/280分别为2.10和2.04,OD260/230分别为2.32和2.24,浓度与纯度均能达到后续分子生物学试验的要求。经PCR与荧光定量PCR检测,该方法提取的RNA无DNA污染,可作为PCR反应的模板,与Trizol方法提取RNA相比,该方法不仅浓度高并且可将提取时间由常规的2.5 h缩短为1.5 h,具有操作简单、高质、高效等优点,经多次试验证明,此方法同样适用于酿酒酵母总RNA的大量提取试验,有较高的实用价值。
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