氨磷汀在体外减轻足叶乙甙所致的骨髓间充质干细胞损伤

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目的研究氨磷汀在体外对化疗药物所致的骨髓间充质干细胞(MSCs)损伤的影响,为其应用于慢性粒细胞白血病(CML)患者的造血干细胞移植提供实验依据。方法采集CML患者的骨髓细胞,应用极限稀释法获取单克隆来源的MSCs,并在低血清培养液中培养和扩增。按实验分组分别加入氨磷汀(氨磷汀组)、足叶乙甙(VP-16组)、氨磷汀和足叶乙甙(联合处理组),并设没有处理的对照组。在药物作用一定时间后,计数MSCs,绘制生长曲线;流式细胞仪检测MSCs的免疫表型及凋亡率;在甲基纤维素半固体培养中检测MSCs作为滋养层支持造血的能力。结果MSCs生长曲线显示,与对照组相比,氨磷汀组的MSCs生长未受明显影响,联合处理组MSCs的生长显著好于VP-16组。培养48 h后,对照组、氨磷汀组、联合处理组和VP-16组的MSCs凋亡率分别为(4.9±0.8)%、(5.6±1.2)%、(18.7±3.4)%和(33.8±5.1)%,氨磷汀组与对照组相比,差异无统计学意义;联合处理组高于对照组,但明显低于VP-16组(P<0.05)。形成粒-单核系集落、红系集落和多系集落的产率,氨磷汀组与对照组间的差异无统计学意义,联合处理组低于对照组(P<0.05),但显著高于VP-16组(P<0.05)。氨磷汀作用前后未见MSCs免疫表型发生明显改变。结论氨磷汀在体外对CML患者骨髓来源MSCs的增殖、凋亡、造血支持能力以及免疫表型无明显影响,但能显著改善足叶乙甙对MSCs所致的生长抑制及功能损伤,提示在预处理中加用氨磷汀可能成为促进CML患者造血干细胞移植后造血恢复的一种新策略。
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