禽流感病毒H5N1血凝素基因在昆虫细胞中的表达及鉴定

来源 :南方医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：feiying7405

【摘要】

：

目的应用杆状病毒．昆虫细胞表达体系克隆及表达禽流感病毒H5NI血凝素H5抗原，鉴定其抗原性和生物活性。方法PCR扩增禽流感病毒H5全长基因序列，克隆、转化制备重组杆状病毒Bacmid

【作者】

：

温坤丘立文王压娣车小燕

【机构】

：

南方医科大学珠江医院临床医学基础研究所

【出处】

：

南方医科大学学报

【发表日期】

：

2007年1期

【关键词】

：

禽流感病毒血凝素抗原杆状病毒昆虫细胞 avian influenza A virus hemagglutinin baculovirus insec

【基金项目】

：

广东省科技计划项目（2005831201007）

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目的应用杆状病毒．昆虫细胞表达体系克隆及表达禽流感病毒H5NI血凝素H5抗原，鉴定其抗原性和生物活性。方法PCR扩增禽流感病毒H5全长基因序列，克隆、转化制备重组杆状病毒Bacmid质粒，通过转染昆虫细胞制备重组杆状病毒进行蛋白表达。采用细胞免疫荧光、Western blotting和血凝试验分别对表达的蛋白进行抗原性和生物活性分析。结果在昆虫细胞中成功表达禽流感病毒重组his-H5蛋白，其相对分子质量约为64000，与豚鼠红细胞能够发生凝集反应，免疫荧光与Westerm blotting结果提示该重组蛋

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