【摘 要】
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采用PCR技术从产肠毒素大肠杆菌C83922质粒中扩增出耐热性肠毒素（STⅠ）和黏附素K99基因片段，进一步结合基因重组技术成功构建了含有融合基因STⅠ—Linker—K99的重组质粒pMSLK；通
【机 构】
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宁夏大学生命科学学院西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（30560110）
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采用PCR技术从产肠毒素大肠杆菌C83922质粒中扩增出耐热性肠毒素（STⅠ）和黏附素K99基因片段，进一步结合基因重组技术成功构建了含有融合基因STⅠ—Linker—K99的重组质粒pMSLK；通过PCR和寡核苷酸定点突变技术将STⅠ毒素中心的6个Cys分别突变成Ser和Gly，经亚克隆后将含有突变位点的融合基因插入到pET-20b表达载体中，获得了重组质粒pES（S）LK和pES（G）LK；将以上2种质粒分别导入到BL21（DE3）菌株中，成功构建BL21（DE3）（pES（S）LK）和BL21（DE
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