单抗MGb1的噬菌体呈现型ScFv片段的制备

来源 :中华内科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wsf3344
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目的 制备胃癌单抗MGb1的噬菌体呈现型单链可变区片段(ScFv),为获得用于胃癌体内诊疗研究的靶向载体分子奠定基础。方法 从杂交瘤细胞分离mRNA,扩增抗体重、轻链可变区(VH和VL)cDNA,经linkerDNA连接形成ScFvDNA。将ScFvDNA与pCANTAB5E的连接产物转化于大肠杆菌TG1,经M13KO7感染后,获得重组噬菌体抗体ScFv。经亲和筛选和ELISA检测获得呈现MGb1ScFv的噬菌体单克隆。结果 VH、VL和ScFvDNA分别约为340bp、320bp和750bp。经筛选得到17个呈现MGb1ScFv的噬菌体单克隆,其中结合抗原能力强的克隆有4个。结论 获得了单抗MGb1的噬菌体呈现ScFv,为拓展抗体的应用范围创造了条件。

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