【摘 要】
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目的:探讨转录因子MZF-1对急性单核细胞白血病新抗原基因MLAA-34的转录调控作用.方法:利用双萤光素酶报告基因检测系统及定点突变技术分析MZF-1对MLAA-34基因启动子转录活性
【机 构】
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西安交通大学第二附属医院血液科,陕西西安,710004
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目的:探讨转录因子MZF-1对急性单核细胞白血病新抗原基因MLAA-34的转录调控作用.方法:利用双萤光素酶报告基因检测系统及定点突变技术分析MZF-1对MLAA-34基因启动子转录活性的影响.通过凝胶电泳迁移率变动检测(electrophoretic mobility slift assay,EMSA)和染色质免疫沉淀检测(chromatin immunoprecipitation,ChIP)实验,验证MZF-1是否与MLAA-34启动子核心区直接特异性结合.构建MZF-1真核表达载体和干涉载体,转染U937细胞,应用RT-PCR和Western blot法检测MLAA-34基因的转录和表达变化.结果:转录因子MZF-1对MLAA-34基因表达具有调控作用,MZF-1结合序列点突变后,相对荧光素酶活性降低(P＜0.01).EMSA和ChIP实验从细胞内、外水平分别证明MZF-1可与MLAA-34启动子直接结合而发挥调控作用.在过表达试验中,MZF-1的增加可上调MLAA-34的表达(P＜0.05);在干涉试验中,MZF-1的降低可下调MLAA-34的表达(P＜0.05).结论:转录因子MZF-1可与MLAA-34基因启动子上的转录调控区结合,并促进急性单核细胞白血病细胞中MLAA-34基因的转录.
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