槟榔植原体膜蛋白基因的克隆及其抗血清制备

来源 :热带作物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ydaf2ut9
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根据实验室测得的槟榔植原体膜蛋白基因(Ac Pmp)序列设计1对特异引物mp-FP/mp-RP,以病样槟榔总DNA为模板扩增该AcPmp的编码区并连接到pMD19T simple中间载体.将测序正确的阳性菌提取质粒pMD1 9T-Ac Pmp,经Nco Ⅰ和XhoⅠ双酶切后回收AcPmp片段,然后以正确的编码框连接到原核表达载体pET32a(+),转化Escherichia coli BL21感受态细胞.含有pET32a-AcPmp的BL21表达菌经IPTG诱导和SDS-PAGE分析表明,在30℃,0.1
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