【摘 要】
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目的克隆黏质沙雷菌ECU1010脂肪酶基因lipB于大肠杆菌中表达后研究其酶学性质。方法 PCR克隆脂肪酶基因,与质粒pET-28a(+)连接后转化至大肠杆菌BL21(DE3)。硫酸铵沉淀法纯化表达产
【机 构】
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华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
【基金项目】
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国家863计划(No.2007AA02Z225)资助, 生物反应器工程国家重点实验室专项经费资助(No.2060204)
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目的克隆黏质沙雷菌ECU1010脂肪酶基因lipB于大肠杆菌中表达后研究其酶学性质。方法 PCR克隆脂肪酶基因,与质粒pET-28a(+)连接后转化至大肠杆菌BL21(DE3)。硫酸铵沉淀法纯化表达产物,研究酶的稳定性等酶学性质。结果成功克隆了S.marcescens ECU1010中脂肪酶基因lipB(GenBank:HM440338),在E.coli中高效表达。LipB最适反应温度40℃,最适pH 8.5。该酶能在pH 5-7条件下保持稳定,Ca2+有促进酶活性的作用。LipB对不同有机溶剂的耐受性与
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