【摘 要】
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目的旨在研究抑制放射抗拒肺癌A549的TLR9表达对其辐射敏感性的影响。方法以放射抗拒肺癌A549(R-A549)细胞为研究对象,利用脂质体转染技术将靶向siRNA转染至R-A549细胞,Western blot验证;给予0、2、4、6和8 Gy X射线照射后,进行细胞克隆集落计数并绘制细胞存活曲线,经过单击多靶模型拟合,得到A549细胞、R-A549细胞、阴性siRNA转染细胞和TLR9 siR
【机 构】
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201508 上海,复旦大学附属金山医院肿瘤科,201508 上海,复旦大学附属金山医院肿瘤科,201508 上海,复旦大学附属金山医院肿瘤科,201508 上海,复旦大学附属金山医院肿瘤科
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目的旨在研究抑制放射抗拒肺癌A549的TLR9表达对其辐射敏感性的影响。
方法以放射抗拒肺癌A549(R-A549)细胞为研究对象,利用脂质体转染技术将靶向siRNA转染至R-A549细胞,Western blot验证;给予0、2、4、6和8 Gy X射线照射后,进行细胞克隆集落计数并绘制细胞存活曲线,经过单击多靶模型拟合,得到A549细胞、R-A549细胞、阴性siRNA转染细胞和TLR9 siRNA转染细胞照射的D0、Dq、N值;对4组细胞增殖能力进行测定。对R-A549细胞、阴性siRNA转染细胞和TLR9 siRNA转染细胞X射线10 Gy照射前后流式细胞周期分析,进一步说明抑制TLR9表达对R-A549细胞辐射敏感性的影响。
结果TLR9 siRNA成功抑制R-A549细胞TLR9表达,照射后其细胞克隆形成率降低,与R-A549细胞的放射增敏比(SERD0)达到1.37,而A549细胞与R-A549细胞的SERD0为1.09;照射后TLR9 siRNA转染细胞较R-A549细胞G2/M期分布增加(t=4.323,P<0.05),而TLR9 siRNA转染细胞G1/G0期分布少于R-A549细胞,差异有统计学意义(t=7.616,P<0.05)。
结论siRNA可以抑制TLR9表达,降低照射后R-A549细胞的克隆形成,提高放射增敏比;照射后更多细胞发生G2/M期阻滞,同时G1/G0期细胞减少也有效抑制了照射后细胞潜在致死性损伤的修复,因此,具有辐射增敏的作用。
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