【摘 要】
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目的了解问号钩端螺旋体(钩体)对THP-1和J774A.1细胞NLRP3炎症小体活化的影响，为钩体感染不同宿主后引起不同炎症性反应的科学解释提供依据。方法分别采用real-time RT-PCR和流式细胞术检测问号钩体56601株感染的THP-1及J774A.1细胞NLRP3 mRNA及蛋白表达水平，采用ELISA结合NLRP3阻断试验检测细胞IL-1β、IL-18和IL-33表达水平。结果问号钩
【机 构】
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550025 贵阳，贵州大学动物科学学院,550081 贵阳市动物疫病预防控制中心,550004 贵阳，贵州省疾病预防控制中心,550004 贵阳，贵州省疾病预防控制中心,550004 贵阳，贵州省疾
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目的了解问号钩端螺旋体(钩体)对THP-1和J774A.1细胞NLRP3炎症小体活化的影响，为钩体感染不同宿主后引起不同炎症性反应的科学解释提供依据。
方法分别采用real-time RT-PCR和流式细胞术检测问号钩体56601株感染的THP-1及J774A.1细胞NLRP3 mRNA及蛋白表达水平，采用ELISA结合NLRP3阻断试验检测细胞IL-1β、IL-18和IL-33表达水平。
结果问号钩体感染1 h、2 h、4 h、12 h和24 h后，THP-1细胞NLRP3 mRNA水平分别为未感染细胞的4.05、0.34、0.33、0.06和1.66倍，J774A.1细胞分别为未感染细胞的12.98、16.19、10.68、5.8和0.57倍(P<0.05)；THP-1细胞NLRP3蛋白表达率分别从感染前的9.26%上升至94.01%、89.24%、31.80%、19.74%和11.28%(P<0.05)，J774A.1细胞分别从感染前的18.71%上升至58.78%、43.64%、36.42%、76.46%和85.21% (P<0.05)；THP-1细胞IL-1β分别上调至73.07 pg/ml、939.24 pg/ml、939.24 pg/ml、843.22 pg/ml和851.06 pg/ml(P<0.05)，J774A.1细胞IL-1β在感染后12 h出现上升，感染12 h和24 h的浓度分别为191.17 pg/ml和254.4 pg/ml(P<0.05)，THP-1细胞IL-18浓度分别为913.89 pg/ml、808.19 pg/ml、483.54 pg/ml、204.19 pg/ml和189.09 pg/ml(P<0.05)，J774A.1细胞IL-18在感染后24 h出现上升，浓度为113.37 pg/ml，THP-1细胞IL-33水平无明显变化(P>0.05)，而J774A.1细胞感染后IL-33水平在12 h和24 h后略有上升(P<0.05)。钩体感染引起THP-1和J774A.1细胞IL-1β、IL-18和IL-33升高均能被NLRP3特异性阻断剂有效阻断(P<0.05)。
结论人和小鼠巨噬细胞感染钩体后NLRP3炎症小体均发生活化并参与介导分泌炎性细胞因子，细胞因子分泌规律存在明显差异，人巨噬细胞感染钩体后IL-1β和IL-18的分泌早于小鼠巨噬细胞，且分泌水平较小鼠巨噬细胞更高。
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