核心蛋白聚糖原核表达体系的构建

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目的通过克隆核心蛋白聚糖(decorin,DCN)基因,构建原核表达体系并表达DEN蛋白。方法利用特异引物,通过反转录一聚合酶链反应(RT—PCR)方法扩增编码DCN分子的外显子序列,与表达载体pET-21a(+)重组,构建原核表达体系pET-21a(+)-DEN的重组质粒。经双酶切、测序鉴定基因序列,将重组质粒转入E.coliBL21(DE3)中,用IPTG37。C诱导获得DCN融合蛋白。结果克隆了hDCN基因,成功构建了pET-21a(+)-DEN重组质粒,获得了稳定的pET-21a(+)-DCN原核
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