【摘 要】
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目的提高异基因造血干细胞移植供、受者HLA-I类配型的精确度,有效防止移植物抗宿主病(GVHD)的发生.方法采用准确、简便的DNA、RNA提取方法和HLA-I类PCR-SSP基因分型方法.建立
【机 构】
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军事医学科学院附属医院免疫学研究室及国家生物医学分析中心免疫分析实验室,
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目的提高异基因造血干细胞移植供、受者HLA-I类配型的精确度,有效防止移植物抗宿主病(GVHD)的发生.方法采用准确、简便的DNA、RNA提取方法和HLA-I类PCR-SSP基因分型方法.建立HLA-A33、A68、B40、B13 PCR-SSP分型方法以及HLA基因序列测序分析.结果对300例中血清学难以判断结果的30例临床标本进行基因水平的研究发现,DNA及RNA提取方法可以满足此项研究对样本的要求.HLA-I类PCR-SSP分型方法具有良好的稳定性、可靠性和特异性;重复率达100%.同时,HLA-A33、A68、B40、B13结果与HLA-I类PCR-SSP分型结果一致.HLA基因测序分析进一步肯定了HLA-I类PCR-SSP分型的特异性.HLA-I类PCR-SSP不受某些血清学影响因素的干扰.整个实验过程仅耗时2.5h.结论 HLA-I类PCR-SSP基因分型方法准确、特异、重复性好,可作为临床骨髓移植配型和正常人群无关供者筛选的常规方法,对GVHD的发生必将起到重要的预防作用.
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