【摘 要】
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获得CHO细胞内稳定表达位点，对于构建重组蛋白CHO稳定表达株、缩短研发时间线具有重要意义。前期研究采用慢病毒感染随机整合Zsgreen1报告基因的方式得到了若干具有潜在稳定表达位点的CHO-K1细胞株。通过细胞连续贴壁培养20代、悬浮培养50代，倒置荧光显微镜观察与流式细胞仪分析Zsgreen1蛋白稳定表达情况，获得一株稳定表达细胞（CHO-K1-1d2）。利用染色体步移技术发现该细胞中稳定表达
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划（863 计划）（2015AA020802）；
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获得CHO细胞内稳定表达位点，对于构建重组蛋白CHO稳定表达株、缩短研发时间线具有重要意义。前期研究采用慢病毒感染随机整合Zsgreen1报告基因的方式得到了若干具有潜在稳定表达位点的CHO-K1细胞株。通过细胞连续贴壁培养20代、悬浮培养50代，倒置荧光显微镜观察与流式细胞仪分析Zsgreen1蛋白稳定表达情况，获得一株稳定表达细胞（CHO-K1-1d2）。利用染色体步移技术发现该细胞中稳定表达位点位于CHO细胞基因组NW-003614092.1上第1159463与1159467碱基间。共转染sgRNA与Cas9质粒，验证了该位点可被CRISPR/Cas9技术编辑。表明CHO细胞基因组NW-003614092.1是一个能够被CRISPR/Cas9技术编辑的稳定表达位点。
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综合实践活动是现阶段小学教育中的一门重要课程，该课程具有较强的实践性和综合性，在对学生创新意识、动手实践能力、科学探究意识等综合素养的培养上起着积极作用，但就目前小学综合实践活动的落实情况来看，存在课程评价不合理的现象，导致该课程的教育功能未能得到充分体现。为此，本文首先对小学综合实践活动课程评价中存在的问题进行了分析，并对小学综合实践活动课程的评价指标和内容进行梳理，最后提出了几点关于小学综合实
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