Hyper-IL-6重组腺病毒的制备

来源 :中国现代医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：shazi009

【摘要】

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目的探讨大量制备高滴度重组腺病毒的方法。方法以Pac-Ⅰ酶切Hyper-IL-6重组腺病毒（AdHIL-6）质粒，乙醇沉淀回收DNA，将线性化的AdHIL-6质粒经脂质体转染293细胞进行病毒的包装扩增

【作者】

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王传敏郄春花秦波

【机构】

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重庆医科大学附属第二医院感染病科,天津市传染病医院检验科

【出处】

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中国现代医学杂志

【发表日期】

：

2009年7期

【关键词】

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重组腺病毒 293细胞超级白细胞介素6 基因治疗 recombinant adenovirus 293 cell hyper-IL-6 gene ther

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目的探讨大量制备高滴度重组腺病毒的方法。方法以Pac-Ⅰ酶切Hyper-IL-6重组腺病毒（AdHIL-6）质粒，乙醇沉淀回收DNA，将线性化的AdHIL-6质粒经脂质体转染293细胞进行病毒的包装扩增，以氯化铯密度梯度离心法纯化重组腺病毒，根据GFP（绿色荧光蛋白）计数法和有限稀释法原理测定病毒滴度及感染293细胞、L02细胞的MOI（Multiplicity of infection，感染复数），并以免疫细胞化学检测感染L02细胞后目的蛋白Hyper-IL-6的表达。结果收集的病毒液经PCR扩增出目的

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