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目的
在大肠埃希菌中建立同时进行PCR克隆和重组蛋白快速表达的方法。
方法通过TA载体将包含目的基因和全部蛋白表达元件的蛋白表达单位引入大肠埃希菌后，无需使用任何限制性酶，直接在大肠埃希菌中表达编码的蛋白质。
结果通过小规模或大规模表达多种不同蛋白质，证实了该方法的有效性和可靠性。使用该方法获得的绿色荧光蛋白和血管内皮生长因子特异性VH的可溶性蛋白表达量分别达到30和20 mg/L。
结论该法设计灵活，且易于进行多种蛋白质的平行表达，为快速筛选理想的蛋白突变体提供了新途径。