【摘 要】
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目的:建立体外酶促反应体系中底物3-脱氧葡萄糖醛酮(3-deoxyglucosone,3-DG)的高效液相色谱检测方法。方法:应用2,3-二氨基萘柱前衍生,采用C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm)为固
【机 构】
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南京中医药大学; 南京中医药大学附属苏州中医院苏州中医药研究所;
【基金项目】
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江苏省中医药管理局科研课题资助项目(编号:2003-2004);苏州市高层次人才资助项目(编号:2004-33)
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目的:建立体外酶促反应体系中底物3-脱氧葡萄糖醛酮(3-deoxyglucosone,3-DG)的高效液相色谱检测方法。方法:应用2,3-二氨基萘柱前衍生,采用C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm)为固定相,50mmol.L-1磷酸盐缓冲液(pH7.4)-甲醇-乙腈(70∶5∶25)为流动相,检测波长为Ex/Em=271/503nm的条件,测定体外酶促反应体系中底物3-DG的含量。结果:3-DG峰呈尖峰,分离较好,理论塔板数为6459;在1～5mg·mL-1范围内线性关系良好(Y=332.40X+34.50,r=0.9992);平均加样回收率为77.17%,RSD为8.98%(n=5)。结论:该方法可初步应用于体外酶促反应体系中底物3-DG的含量测定,并以3-DG的消耗量来反映体系中酶的活性。
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