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按照nanog基因编码序列设计合成引物，利用RT-PCR从小鼠的囊胚期胚胎中扩增得到该基因，并将该基因克隆到pET-28b（＋）栽体上，获得pET-28b（＋）-nanog原核表达重组质粒，限制性酶分析和DNA序列测定均证实该克隆插入片段为nanog基因编码序列。重组质粒转化大肠杆菌Bk21（DE3），经IPTG诱导表达，在大肠杆菌表达系统中获得了高效表达，western杂交证实该蛋白具有6-His抗原活性，从而证实目的蛋白为Nanog蛋白。