果糖通过尿酸和活性氧簇诱导人肾小管上皮细胞单核细胞趋化蛋白-1的表达

来源 :上海交通大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:a139471569
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目的·探讨果糖诱导肾小管上皮细胞表达单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattratant protein-1,MCP-1)的机制。方法·将HK-2细胞分为对照组,果糖孵育(1、5和10 mmol/L)组,果糖、己酮糖激酶抑制剂(KHK-IN)共孵育(果糖5 mmol/L,KHKIN分别为12、100和1 000 nmol/L)组,尿酸孵育(5、15和50 mg/d L)组,果糖、别嘌醇共孵育(果糖5 mmol/L,别嘌醇分别为0.01、0.1和0.5 mmol/L)组,尿酸、别嘌醇共孵育(尿酸50 mg/d L,别嘌醇分别为0.01、0.1和0.5 mmol/L)组,H2O2孵育(0.1和0.3 mmol/L)组,果糖、N-乙酰半胱氨酸(NAC)共孵育(果糖5 mmol/L,NAC分别为5、10和50 mmol/L)组,尿酸、NAC共孵育(尿酸50 mg/d L,NAC分别为5、10和50 mmol/L)组。采用实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹实验检测MCP-1 m RNA和蛋白的表达;利用活性氧(ROS)荧光探针观察果糖和尿酸对HK-2细胞ROS产生的影响。结果·果糖剂量及时间依赖性诱导HK-2细胞MCP-1 m RNA转录和蛋白表达,此过程可被KHK-IN阻断。外源性尿酸诱导HK-2细胞产生MCP-1,别嘌醇抑制果糖引起的MCP-1表达,但不能阻断外源性尿酸的作用。果糖和尿酸均诱导HK-2细胞产生ROS,别嘌醇抑制了果糖而非外源性尿酸诱导的ROS产生。H2O2诱导HK-2细胞生成MCP-1,NAC则抑制这种作用。结论·果糖在己酮糖激酶催化下,通过引起细胞内尿酸升高和产生ROS,导致人肾小管上皮细胞产生MCP-1。
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