探讨TGF-β1受体抑制剂SD-208对人增生性瘢痕的作用及其机制。
方法取废弃人增生性瘢痕组织，分离瘢痕Fb，并进行传代培养，采用第5代细胞进行以下实验。(1)按照随机数字表法(分组方法下同)将细胞分为空白对照组及0.5、1.0、3.0、5.0 μmol/L SD-208组，每组6孔。空白对照组加入1 μL PBS，后4组分别加入1 μL 0.5、1.0、3.0、5.0 μmol/L SD-208，培养12 h，细胞计数试剂盒8及酶标仪检测细胞增殖活性(以吸光度值表示)。根据细胞增殖活性结果选取适宜物质的量浓度的SD-208用于后续实验。(2)另取细胞，分为空白对照组及1、3 μmol/L SD-208组，同(1)处理，每组8孔，Transwell法检测迁移细胞数。(3)另取细胞，同(2)分组处理，罗丹明-鬼笔环肽染色，观察细胞微丝形态。(4)另取细胞，同(2)分组处理，蛋白质印迹法检测TGF-β1蛋白表达。(5)取48只BALB/c裸鼠，分为生理盐水组24只与1 μmol/L SD-208组24只，于背部做长度为1 cm的纵行切口，埋置人增生性瘢痕组织块。伤后7 d，生理盐水组与1 μmol/L SD-208组裸鼠瘢痕内分别多点注射0.05 mL生理盐水及1 μmol/L SD-208，每日注射1次。于首次给药后0(当日)、2、4、6、8、10、12、14、16、18、20 d，取8只裸鼠，电子秤称量体质量；用游标卡尺测量瘢痕面积，计算剩余瘢痕面积百分比。于首次给药后1、2、3周，取出人增生性瘢痕组织块，免疫组织化学染色法检测TGF-β1蛋白表达。对数据行单因素方差分析、两独立样本t检验。
结果(1)空白对照组及0.5、1.0、3.0、5.0 μmol/L SD-208组细胞增殖活性分别为1.00±0.03、0.90±0.08、0.68±0.11、0.54±0.04、0.42±0.09，0.5、1.0、3.0、5.0 μmol/L SD-208组细胞增殖活性均明显低于空白对照组(t值为2.9～22.1，P<0.05或P<0.01)。(2)1、3 μmol/L SD-208组迁移细胞数均明显少于空白对照组(t值分别为6.5、6.4，P值均小于0.01)。(3)与空白对照组比较，1、3 μmol/L SD-208组细胞的微丝荧光强度减弱，伪足伸出减少。(4)空白对照组及1、3 μmol/L SD-208组细胞TGF-β1蛋白表达量分别为1.00±0.08、0.80±0.08、0.61±0.05，1、3 μmol/L SD-208组细胞TGF-β1蛋白表达量均明显低于空白对照组(t值分别为4.0、9.2，P值均小于0.01)。(5)生理盐水组、1 μmol/L SD-208组裸鼠各时相点体质量相近(t值为0.2～1.1，P值均大于0.05)。2组裸鼠剩余瘢痕面积百分比随给药时间延长降低，首次给药后6～20 d，1 μmol/L SD-208组裸鼠剩余瘢痕面积百分比明显小于生理盐水组(t值为1.8～15.9，P<0.05或P<0.01)。首次给药后1、2、3周，2组裸鼠体内人增生性瘢痕TGF-β1蛋白表达量均呈下降趋势，且1 μmol/L SD-208组裸鼠体内人增生性瘢痕TGF-β1蛋白表达量明显低于生理盐水组(t值为6.2～19.1，P值均小于0.01)。
结论SD-208对人增生性瘢痕有明显的抑制作用，其作用机制与抑制内源性TGF-β1蛋白表达有关。