【摘 要】
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目的 为获得诱导表达的绵羊卵泡抑制素基因蛋白及其多克隆抗体.方法 试验首先对绵羊卵泡抑制素α基因原核表达产物进行诱导表达及可溶性分析,其次运用以镍柱亲层析和尿素透析
【机 构】
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石河子大学 动物科技学院,新疆 石河子,832003新疆农垦科学院省部共建绵羊育种与健康养殖国家重点实验室,新疆 石河子,832000;
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目的 为获得诱导表达的绵羊卵泡抑制素基因蛋白及其多克隆抗体.方法 试验首先对绵羊卵泡抑制素α基因原核表达产物进行诱导表达及可溶性分析,其次运用以镍柱亲层析和尿素透析的方法收集其表达蛋白并用弗氏佐剂对其进行乳化,最后将乳化后的蛋白免疫制剂对新疆双峰骆驼进行多次加强免疫,以获得卵泡抑制素α基因多克隆抗体.结果 绵羊卵泡抑制素α基因原核表达产物在IPTG诱导作用下呈包涵体形式存在,蛋白纯度较高,免疫后血清抗体效价为5.12×106,SDS-PAGE 电泳分析结果显示,在39 ku 有常规抗体的条带存在,在26 ku 处存在纳米抗体的条带.结论 绵羊卵泡抑制素α蛋白经纯化后对双峰骆驼免疫可以获得高效价、高纯度的抑制素α多克隆抗体.
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