【摘 要】
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为了构建高表达pET28a-TAT-LacZ重组子,观察表达的融合蛋白TAT- β-Gal能否穿过生物膜,使用人工合成编码TAT蛋白转导区的DNA片段,插入载体pET28a组氨酸编码区后再连接lacZ基
【机 构】
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郧阳医学院附属十堰市人民医院检验部,郧阳医学院生,郧阳医学院附属太和医院神经内科,郧阳医学院附属十堰市人民医院检验部
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为了构建高表达pET28a-TAT-LacZ重组子,观察表达的融合蛋白TAT- β-Gal能否穿过生物膜,使用人工合成编码TAT蛋白转导区的DNA片段,插入载体pET28a组氨酸编码区后再连接lacZ基因,组成pET28a-TAT-LacZ重组表达子,转化大肠杆菌, 利用组氨酸亲和层析柱纯化TAT-β-Gal融合蛋白,将融合蛋白加入培养的平滑肌细胞.得到高度纯化的、有活性的TAT-β-Gal融合蛋白, TAT-β-Gal在短时间内进入体外培养平滑肌细胞,成功地构建了高表达pET28a-TAT-LacZ重组
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