论文部分内容阅读
目的 探讨RNA干扰技术沉默乏氧诱导因子(HIF)-1α对食管鳞癌EC9706细胞乏氧条件下化疗敏感性的影响及其机制.方法 应用化学乏氧法[氯化钴(CoCl2)加入培养液的终浓度为75 μmol/L]体外模拟肿瘤乏氧微环境.采用MTS比色法检测常氧培养组和乏氧培养组EC9706细胞在顺铂/紫杉醇作用下细胞的抑制率,以及RNA干扰后乏氧培养细胞在顺铂/紫杉醇作用下细胞的抑制率.应用Western印迹方法检测HIF-1α基因沉默后乏氧诱导HIF-1α蛋白表达变化.用流式细胞仪检测RNA干扰前后乏氧条件下EC9706细胞的细胞周期.结果 针对HIF-1α基因的siRNA干扰技术,有效抑制乏氧诱导的HIF-1α蛋白表达.同一药物浓度常氧培养组细胞抑制率均明显高于乏氧培养组(均P＜0.05).相同药物浓度及相同的乏氧条件下RNA干扰组抑制率均明显高于未转染组及转染control siRNA组(均P＜0.05).相同的乏氧条件下转染HIF-1α siRNA与未转染组/转染无关对照siRNA组相比,S期显著增加(P＜0.05)、G1期细胞减少(P＜0.05).结论 乏氧条件下HIF-1α诱导EC9706细胞周期停止,可能是乏氧条件下细胞耐药的机制之一.RNA干扰可逆转食管癌细胞EC9706乏氧环境中化疗耐药。