【摘 要】
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目的:观察宫颈癌HeLa细胞转染醛缩酶A(aldolaseA,ALDOA)后,在X线作用下ALDOA在细胞内定位的改变,以及其对细胞存活率的影响.方法:克隆出ALDOA全长编码序列,构建真核表达质粒p
【机 构】
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南方医科大学珠江医院器官移植科,广东,广州,510515;南方医科大学中医药学院中医症候实验室,广东广州,510515;南方医科大学南方医院影像中心,广东广州,510515;南方医科大学教育部和广东省
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目的:观察宫颈癌HeLa细胞转染醛缩酶A(aldolaseA,ALDOA)后,在X线作用下ALDOA在细胞内定位的改变,以及其对细胞存活率的影响.方法:克隆出ALDOA全长编码序列,构建真核表达质粒pECFP-C1-ALDOA,实验组通过脂质体介导将pECFP-C1-ALDOA转染HeLa细胞,设载体pECFP-C1作为阴性对照,各组均给予X线照射,荧光显微镜观察照射前后HeLa细胞中pECFP-C1-ALDOA和pECFP-C1表达及定位的变化,用XTT法检测细胞存活率的改变.结果:双酶切和DNA测序证明所构建质粒正确;荧光显微镜下观察HeLa细胞内pECFP-C1-ALDOA主要分布于胞浆,pECFP-C1为全细胞均匀分布;经X线照射24 h后胞浆中的pECFP-C1-ALDOA逐渐转至胞核,而pECFP-C1在细胞内的定位则不发生明显改变;经XTT法检测,发现X线照射后,转染pECFP-C1-ALDOA质粒的细胞存活率明显高于转染pCFP-C1的对照组细胞.结论:抑制ALDOA的表达,可使X线更易诱导宫颈癌细胞的死亡,因此其可能作为官颈癌放射治疗的新靶点.
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