【摘 要】
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目的构建携带HBx基因的非复制型重组腺病毒载体,并感染小鼠肾小球足细胞株MPC5,使目的基因HBx在该细胞株有效表达。方法由质粒PCI-neo-HBx中扩增目的基因HBx,插入至pShuttle-
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科
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目的构建携带HBx基因的非复制型重组腺病毒载体,并感染小鼠肾小球足细胞株MPC5,使目的基因HBx在该细胞株有效表达。方法由质粒PCI-neo-HBx中扩增目的基因HBx,插入至pShuttle-CMV（-）穿梭质粒中,而后再与pAdxsi质粒酶切连接为重组腺病毒质粒pAd-HBx,经酶切及测序鉴定正确后,以PacⅠ酶切线性化转染293细胞进行包装扩增得到Ad-HBx。以Ad-HBx感染MPC5细胞,Western blot检测感染后目的蛋白HBx的表达。结果重组腺病毒载体经限制性内切酶酶切、电泳和基因测
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