【摘 要】
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为对杆状病毒表达系统制备的重组禽腺联病毒进行生物学特性的鉴定,将含GFP报告基因及AAAV两侧末端重复序列的重组杆状病毒rBac-GFP、表达AAAV结构蛋白的重组杆状病毒rBac-VP
【机 构】
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江苏农牧科技职业学院/江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金(编号:31302096);江苏省科技支撑计划(编号:BE2013415);江苏省六大人才高峰项目(编号:NY-009)
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为对杆状病毒表达系统制备的重组禽腺联病毒进行生物学特性的鉴定,将含GFP报告基因及AAAV两侧末端重复序列的重组杆状病毒rBac-GFP、表达AAAV结构蛋白的重组杆状病毒rBac-VP、表达AAAV功能蛋白的重组杆状病毒rBac-Rep以感染复数为5,同时感染摇瓶培养中的昆虫细胞Sf9,72h后收集细胞沉淀,反复冻融3~5次后,离心取上清。经滤膜过滤、氯仿抽提和PEG沉淀后,进行电镜观察和Western blot分析,并体外感染鸡成纤维细胞和鸡肝细胞系。SDS-PAGE结果显示,rAAAV得到了较好的纯
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