【摘 要】
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目的筛选高表达同源异型盒基因(HOXA13)的肝癌细胞株，通过RNA干扰(RNAi)技术敲除HOXA13，观察敲除该基因后所引起的生物学效应。方法通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot法筛选出高表达HOXA13的肝癌细胞株，利用质粒对目的细胞HOXA13进行转染使基因沉默，实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)、Western blot法验证其表达，再通过细胞计数试剂
【机 构】
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363000 漳州，福建医科大学附属漳州市医院肝胆外科,046000 长治，山西省长治市人民医院外科,363000 漳州，福建医科大学附属漳州市医院肝胆外科
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目的筛选高表达同源异型盒基因(HOXA13)的肝癌细胞株，通过RNA干扰(RNAi)技术敲除HOXA13，观察敲除该基因后所引起的生物学效应。
方法通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot法筛选出高表达HOXA13的肝癌细胞株，利用质粒对目的细胞HOXA13进行转染使基因沉默，实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)、Western blot法验证其表达，再通过细胞计数试剂盒(CCK-8)、Transwell细胞侵袭实验、平板克隆、流式细胞实验验证其细胞功能。
结果RT-PCR与Western blot检测肝细胞癌细胞株MHCC-97H中HOXA13的mRNA及蛋白水平(14.010±0.431、0.702±0.062)，明显高于HepG2、Huh-7、SMMC-7721(12.292±0.821、0.653±0.087；11.750±1.271、0.527±0.069；11.242±2.031、0.420±0.075，P<0.05)。HOXA13-RNAi干扰组细胞(3.215±0.022、0.117±0.016)其HOXA13表达明显低于阴性对照组和空白对照组(9.426±1.006、0.364±0.025；10.517±1.412、0.426±0.047，P<0.05)。CCK-8法检测结果显示HOXA13-RNAi组的增殖能力(0.368±0.115)明显低于阴性对照组和空白对照(0.688±0.352、0.684±0.322，P<0.001)。体外Transwell侵袭实验检测结果显示，实验组细胞穿过聚碳酸酯膜的细胞数[(47.302±5.410)个]明显少于阴性对照组和空白对照组[(82.221±11.102)、(84.322±12.520)个]的细胞数(P<0.01)。HOXA13基因在MHCC-97H细胞中沉默后明显降低肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力，抑制肝癌的发生及发展。
结论HOXA13基因在MHCC-97H沉默后能抑制肝癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力，抑制肝癌的发生发展。
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