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【摘要】目的探讨骨肉瘤患者血清中白细胞介素27（IL27）、白细胞介素10（IL10）的表达意义。方法选取2005～2013年间收治的160例肢体骨肉瘤患者作为骨肉瘤组，健康体检人群250人作为健康对照组。采集两组研究对象的外周血，用酶联免疫吸附试验法（ELISA）检测血清中IL27、IL10的表达水平，分析其与骨肉瘤发病及进展关系。结果骨肉瘤组的IL27、IL10水平均低于健康对照组，差异有统计学意义（P<0.01）。在骨肉瘤患者中，IL27与肿瘤的临床分期和是否有转移明显相关，处于肿瘤发病Ⅲ～Ⅳ期的患者其血清IL27水平低于Ⅰ～Ⅱ期患者（P<001），合并远处转移的患者血清IL27水平低于无远处转移的患者（P<0.01）。但IL10与骨肉瘤的相关临床特征均无相关性，且血清IL27水平与IL10水平也无明显线性相关（r=0.076，P=0.594）。结论IL27、IL10参与了骨肉瘤的免疫调节，IL27的低表达可能与骨肉瘤的进展相关。
【关键词】骨肉瘤；IL27；IL10
中图分类号：R738.1文献标识码：ADOI：10.3969/j.issn.10031383.2016.03.002
【Abstract】ObjectiveTo investigate the significance of expression of IL27 and IL10 in serum of patients with osteosarcoma.Methods160 cases of patients with osteosarcoma admitted to hospital from 2005 to 2013 were selected as osteosarcoma group，and 250 healthy people who received physical examination as control group.Peripheral blood was collected from the 2 groups，and expression levels of IL10 and IL27 in serum were tested by ELISA and then its relationship with the morbidity and development situation of osteosarcoma was analyzed.ResultsThe levels of serum IL10 and IL27 in the case group were lower on average than those of the control group，so difference was statistically significant（P<0.01）.The level of IL27 in osteosarcoma patients was significantly correlated with tumor stages and metastasis.IL27 level in serum of patients in tumor stages Ⅲ～Ⅳ were lower than those in stagesⅠ～Ⅱ（P<0.01）.The similar results were also found in patients with metastasis，patients with merger of distant metastasis had lower IL27 levels than those without distant metastasis（P<0.01）.But there was no correlation between IL10 and the clinical features of osteosarcoma，and no significant linear correlation were found between IL27 and IL10 levels（r=0.076，P=0.594）.ConclusionIL27 and IL10 involve in the immune regulation of osteosarcoma.The low expression of IL27 may be related to the progression of osteosarcoma.
【Key words】osteosarcoma；IL27； IL10
骨肉瘤（osteosarcoma）是青壮年原发性骨肿瘤中发病率最高的一类恶性肿瘤，多发于股骨、胫骨和肱骨等四肢骨[1，2]。骨肉瘤的特征是恶性骨成骨细胞的分化和生产。其恶性程度甚高，预后极差，可于数月内出现肺部转移，截肢后3～5年存活率仅为60%左右[3，4]。虽然近年来骨肉瘤在病因、发生发展、诊断和治疗等方面有了一些进展，但进展十分缓慢，具体发病机制仍然不清楚。其次缺少骨肉瘤诊断和治疗的有效靶标，进一步寻找生物靶标，将具有重要的理论和临床应用价值。近年来，肿瘤免疫学进展迅速，肿瘤免疫微环境得到了广大学者的关注。肿瘤微环境分泌大量的炎症因子，如细胞因子、生长因子、趋化因子等，炎症因子共同参与肿瘤的进展[5]，而细胞因子又成了研究的热点[6]。白细胞介素10（Interleukin10，IL10）是由巨噬细胞、辅助性T细胞、淋巴细胞等产生的一种多效性细胞因子，已被证明能够抑制刺激免疫反应，参与多种恶性肿瘤的发生和发展。白细胞介素27 （Interleukin27，IL27） 参与Th1细胞的分化，能增强细胞的免疫反应，研究表明，IL27可通过多种机制抑制肿瘤的进展，无视肿瘤的免疫原性。因此，IL10、IL27有可能成为肿瘤治疗中有价值的指标，有望成为新的免疫治疗因子。为此，本研究探讨了骨肉瘤患者血清中IL10、IL27的变化，分析了IL10、IL27的表达及其变化的意义，为临床提高骨肉瘤的疗效提供一定的依据。 1资料与方法1.1临床资料选取2005～2013年间我院骨科收治的160例四肢骨肉瘤患者（骨肉瘤组）与健康体检者250人（健康对照组）作为研究对象。病例纳入标准：①发病部位为四肢骨，且经皮穿刺组织病理学活检确诊为骨肉瘤。②无家族性肿瘤史。③健康对照组为我院健康体检人群；个人及家族史无肿瘤或其他严重疾病。④所有患者知情同意本研究，依从性良好，愿意接受随访。排除标准：①心、肝、肾、肺功能不全者或罹患其他系统严重疾病者。②妊娠或哺乳女性。③已接受抗癌、糖皮质激素、其他非甾体类抗炎药物可能影响免疫功能等治疗。④无自身免疫性疾病。本研究通过医院伦理委员会批准，患者及家属均签署知情同意书。两组受试者间的年龄及性别分布均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。见表1。
1.2检测方法所有病例均在入院第1天抽取静脉血，低温保存待测。采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验法（ELISA）检测血清IL10和IL27含量。IL10和IL27试剂盒均为上海天昊生物科技有限公司产品。
1.3统计学方法利用SPSS 17.0统计软件对数据进行统计分析，计量资料采用均数±标准差（±s）表示，组间比较采用两独立样本t检验；计数资料采用率或百分比表示，组间比较采用χ2检验；采用多因素Logistic回归模型分析IL10、IL27水平与骨肉瘤患者临床特征之间的关系；采用Pearson方法进行IL10水平与IL27水平之间的线性相关分析。检验水准：α=0.05。
2结果2.1两组IL10及IL27水平的比较经检验，骨肉瘤组血清IL10、IL27平均浓度明显低于健康对照组，差异有统计学意义（P<0.001）。见表2。
2.2骨肉瘤患者血清IL10与IL27水平的相关性分析经Pearson线性相关分析，骨肉瘤患者血清IL10与IL27水平无明显线性相关（r=0.076，P=0594）。
2.3血清IL10、IL27水平与骨肉瘤临床特征之间的关系将血清IL10、IL27按百分位进行分组作为因变量，患者的年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位、临床分期及转移作为自变量建立Logistic回归模型，其赋值情况见表3。结果显示：在骨肉瘤患者中，血清IL10水平与患者的年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位、临床分期及转移均无明显相关；而血清IL27水平受临床分期和是否有远处转移的影响。处于肿瘤发病Ⅲ～Ⅳ期的患者其血清IL27水平低于Ⅰ～Ⅱ期患者；合并远处转移的患者血清IL27水平低于无远处转移的患者。见表4。
3讨论
骨肉瘤的发生与进展取决于机体自身的免疫状态。IL10是参与肿瘤微环境内介导免疫抑制的重要细胞因子[7]，通过免疫抑制作用，能够中和体内过强的免疫反应。IL10通过抑制IL1、IFNγ、TNFα等促炎因子的分泌来达到抑制炎症反应的目的。同时，IL10也通过下调抗原提呈细胞（APC）来反馈调节效应T细胞[8]。IL10不仅能够发挥重要的免疫抑制作用，同时也能刺激免疫作用[9]。IL27是新近发现的 IL6/IL12家族的细胞因子，主要由活化的抗原提呈细胞（包括单核巨噬细胞和树突状细胞）产生，通过与其受体IL27R （WSX1/gp130）结合发挥生物学功能[10]。研究发现，IL27具有抗肿瘤活性，能够抑制血管的生成和促进肿瘤细胞的凋亡，在抗肿瘤免疫以及以Th1型免疫主导的病理过程中发挥重要作用[11]。既往的研究已表明IL27参与了多种机体肿瘤的发生与进展，如与前列腺癌及其骨转移、食管癌淋巴转移、黑色素瘤等肿瘤密切相关[12]，IL27无论对原发或者继发性肿瘤均有抑制作用，这使它成为低免疫源性肿瘤治疗潜在的新靶点。
本研究发现，骨肉瘤患者与健康人群相比，血清IL27表达明显下降。提示低表达的IL27水平可能导致Th1细胞毒性反应减弱进而导致骨肉瘤的发生。同时我们探讨了血清IL27水平与骨肉瘤患者各临床特征的相关性，结果显示IL27水平并不与骨肉瘤患者的年龄、性别、瘤体大小及部位相关。临床分期为Ⅲ～Ⅳ期的患者和发生远处转移的患者血清IL27均呈现显著的低水平，提示血清IL27水平下降可能与骨肉瘤的进展相关，可能的机制如下：（1）特异性 CD8+T细胞通过IL27调节参与机体抗肿瘤或者在活体直接起到抗肿瘤增殖作用[13]。（2）血管形成作用和NK细胞被IL27抑制，从而抑制了肿瘤生长和转移。因此IL27可能是一种潜在的抗肿瘤细胞因子，其主要通过 CD8+T细胞，分泌IFNγ发挥抗肿瘤作用，对免疫原性高低不同的肿瘤细胞发挥抑制肿瘤生长和转移作用，尤其对免疫原性低的肿瘤发挥无可比拟的作用[14]，其可以通过抑制血管形成来抑制肿瘤的增殖。
本研究发现，骨肉瘤患者与健康人群相比，血清IL10表达下降，考虑为：（1）IL27对IL10的分子调节机制作用。有研究表明IL27可通过诱导cMaf的表达来促进细胞因子IL21的产生和上调诱导共刺激分子（ICOS）的表达，从而诱导分泌IL10的Tr1细胞的分化和增殖[15]。在骨肉瘤环境下IL27可能对IL10有调节作用。（2）肿瘤微环境中IL10对免疫应答的负向调节作用。（3）IL10通过APC发挥免疫抑制。而本研究发现IL27与IL10无相关性，考虑两者在骨肉瘤表达中各自有其表达的机制，IL27与IL10在本次研究均下降，彼此有一定的联系，但具体机制尚不明确。
本次研究也存在着一些局限性。第一，本次研究的样本数相对较小，可能会影响统计的效能。第二，样本来源于特定的地区，拥有自身独特的遗传背景，因此，本研究结论可能并不一定适用于其他地区与种族的人群。第三，本研究骨肉瘤患者的选取是以医院为基础，对照组则来源于广大社区，实验设计为病例对照设计而非随机设计，可能会存在选择偏倚。因此，未来我们将展开更大样本及多民族广泛参与的实验研究，进一步探讨IL27、IL10与骨肉瘤发病风险的关系。
总之，骨肉瘤患者机体存在免疫调节失衡，IL10及IL27参与其中，它们的表达异常与骨肉瘤的发生密切相关，可能在骨肉瘤患者抗肿瘤免疫中发挥重要作用，随着对骨肉瘤发生及进展研究的深入，血清IL10及IL27表达水平的检测也有望成为骨肉瘤诊断、治疗及判断疗效预后的重要参考指标。
参考文献
[1]He JP，Hao Y，Wang XL，et al.Review of the molecular pathogenesis of osteosarcoma[J].Asian Pac J Cancer Prev，2014， 15（15）：59675976.
[2]Luetke A，Meyers PA，Lewis I，et al.Osteosarcoma treatmentwhere do we stand？ A state of the art review[J].Cancer Treat Rev，2014，40（4）：523532.
[3]Bai SB，Chen HX，Bao YX，et al.Predictive impact of common variations in DNA repair genes on clinical outcome of osteosarcoma[J].Asian Pac J Cancer Prev，2013，14（6）：36773680.
[4]Boerman I，Selvarajah GT，Nielen M，et al.Prognostic factors in canine appendicular osteosarcomaa metaanalysis[J].BMC Vet Res，2012（8）：56.
[5]Umansky V，Sevko A.Tumor microenvironment and myeloidderived suppressor cells[J].Cancer Microenviron，2013，6（2）：169177.
[6]Xiao H，Chen L，Luo G，et al.Effect of the cytokine levels in serum on osteosarcoma[J].Tumour Biol，2014，35（2）：10231028.
[7]Yi Y，He HW，Wang JX，et al.The functional impairment of HCCinfiltrating gammadelta T cells，partially mediated by regulatory T cells in a TGFbetaand IL10dependent manner[J].Journal of hepatology，2013，58（5）：977983.
[8]Li Z，Chen L，Rubinstein MP.Cancer immunotherapy：are we there yet？[J].Exp Hematol Oncol，2013，2（1）：33.
[9]Tanikawa T，Wilke CM，Kryczek I，et al.Interleukin10 ablation promotes tumor development，growth，and metastasis[J].Cancer research，2012，72（2）：420429.
[10]Tao YP，Wang WL，Li SY，et al.Associations between polymorphisms in IL12A，IL12B，IL12Rbeta1，IL27 gene and serum levels of IL12p40， IL27p28 with esophageal cancer[J].J Cancer Res Clin Oncol，2012，138（11）：18911900.
[11]Huang ZQ，Wang JL，Pan GG，et al.Association of single nucleotide polymorphisms in IL12 and IL27 genes with colorectal cancer[J].Clin Biochem，2012，45（12）：5459.
[12]Di Carlo E，Sorrentino C，Zorzoli A，et al.The antitumor potential of interleukin27 in prostate cancer[J].Oncotarget，2014，5（21）：1033210341.
[13]Peng Q，Qin X，He Y，et al.Association of IL27 gene polymorphisms and HBVrelated hepatocellular carcinoma risk in a Chinese population[J].Infect Genet Evol，2013（16）：14.
[14]Wynick C，Petes C，Gee K.Interleukin27 mediates inflammation during chronic disease[J].Interferon Cytokine Res，2014，34（10）：741749.
[15]Pot C，Jin H，Awasthi A，et al.Cutting edge：IL27 induces the transcription factor cMaf，cytokine IL21，and the costimulatory receptor ICOS that coordinately act together to promote differentiation of IL10producing Tr1 cells[J].J Immunol，2009，183（2）：797801.
（编辑：潘明志）
【关键词】骨肉瘤；IL27；IL10
中图分类号：R738.1文献标识码：ADOI：10.3969/j.issn.10031383.2016.03.002
【Abstract】ObjectiveTo investigate the significance of expression of IL27 and IL10 in serum of patients with osteosarcoma.Methods160 cases of patients with osteosarcoma admitted to hospital from 2005 to 2013 were selected as osteosarcoma group，and 250 healthy people who received physical examination as control group.Peripheral blood was collected from the 2 groups，and expression levels of IL10 and IL27 in serum were tested by ELISA and then its relationship with the morbidity and development situation of osteosarcoma was analyzed.ResultsThe levels of serum IL10 and IL27 in the case group were lower on average than those of the control group，so difference was statistically significant（P<0.01）.The level of IL27 in osteosarcoma patients was significantly correlated with tumor stages and metastasis.IL27 level in serum of patients in tumor stages Ⅲ～Ⅳ were lower than those in stagesⅠ～Ⅱ（P<0.01）.The similar results were also found in patients with metastasis，patients with merger of distant metastasis had lower IL27 levels than those without distant metastasis（P<0.01）.But there was no correlation between IL10 and the clinical features of osteosarcoma，and no significant linear correlation were found between IL27 and IL10 levels（r=0.076，P=0.594）.ConclusionIL27 and IL10 involve in the immune regulation of osteosarcoma.The low expression of IL27 may be related to the progression of osteosarcoma.
【Key words】osteosarcoma；IL27； IL10
骨肉瘤（osteosarcoma）是青壮年原发性骨肿瘤中发病率最高的一类恶性肿瘤，多发于股骨、胫骨和肱骨等四肢骨[1，2]。骨肉瘤的特征是恶性骨成骨细胞的分化和生产。其恶性程度甚高，预后极差，可于数月内出现肺部转移，截肢后3～5年存活率仅为60%左右[3，4]。虽然近年来骨肉瘤在病因、发生发展、诊断和治疗等方面有了一些进展，但进展十分缓慢，具体发病机制仍然不清楚。其次缺少骨肉瘤诊断和治疗的有效靶标，进一步寻找生物靶标，将具有重要的理论和临床应用价值。近年来，肿瘤免疫学进展迅速，肿瘤免疫微环境得到了广大学者的关注。肿瘤微环境分泌大量的炎症因子，如细胞因子、生长因子、趋化因子等，炎症因子共同参与肿瘤的进展[5]，而细胞因子又成了研究的热点[6]。白细胞介素10（Interleukin10，IL10）是由巨噬细胞、辅助性T细胞、淋巴细胞等产生的一种多效性细胞因子，已被证明能够抑制刺激免疫反应，参与多种恶性肿瘤的发生和发展。白细胞介素27 （Interleukin27，IL27） 参与Th1细胞的分化，能增强细胞的免疫反应，研究表明，IL27可通过多种机制抑制肿瘤的进展，无视肿瘤的免疫原性。因此，IL10、IL27有可能成为肿瘤治疗中有价值的指标，有望成为新的免疫治疗因子。为此，本研究探讨了骨肉瘤患者血清中IL10、IL27的变化，分析了IL10、IL27的表达及其变化的意义，为临床提高骨肉瘤的疗效提供一定的依据。 1资料与方法1.1临床资料选取2005～2013年间我院骨科收治的160例四肢骨肉瘤患者（骨肉瘤组）与健康体检者250人（健康对照组）作为研究对象。病例纳入标准：①发病部位为四肢骨，且经皮穿刺组织病理学活检确诊为骨肉瘤。②无家族性肿瘤史。③健康对照组为我院健康体检人群；个人及家族史无肿瘤或其他严重疾病。④所有患者知情同意本研究，依从性良好，愿意接受随访。排除标准：①心、肝、肾、肺功能不全者或罹患其他系统严重疾病者。②妊娠或哺乳女性。③已接受抗癌、糖皮质激素、其他非甾体类抗炎药物可能影响免疫功能等治疗。④无自身免疫性疾病。本研究通过医院伦理委员会批准，患者及家属均签署知情同意书。两组受试者间的年龄及性别分布均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。见表1。
1.2检测方法所有病例均在入院第1天抽取静脉血，低温保存待测。采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验法（ELISA）检测血清IL10和IL27含量。IL10和IL27试剂盒均为上海天昊生物科技有限公司产品。
1.3统计学方法利用SPSS 17.0统计软件对数据进行统计分析，计量资料采用均数±标准差（±s）表示，组间比较采用两独立样本t检验；计数资料采用率或百分比表示，组间比较采用χ2检验；采用多因素Logistic回归模型分析IL10、IL27水平与骨肉瘤患者临床特征之间的关系；采用Pearson方法进行IL10水平与IL27水平之间的线性相关分析。检验水准：α=0.05。
2结果2.1两组IL10及IL27水平的比较经检验，骨肉瘤组血清IL10、IL27平均浓度明显低于健康对照组，差异有统计学意义（P<0.001）。见表2。
2.2骨肉瘤患者血清IL10与IL27水平的相关性分析经Pearson线性相关分析，骨肉瘤患者血清IL10与IL27水平无明显线性相关（r=0.076，P=0594）。
2.3血清IL10、IL27水平与骨肉瘤临床特征之间的关系将血清IL10、IL27按百分位进行分组作为因变量，患者的年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位、临床分期及转移作为自变量建立Logistic回归模型，其赋值情况见表3。结果显示：在骨肉瘤患者中，血清IL10水平与患者的年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位、临床分期及转移均无明显相关；而血清IL27水平受临床分期和是否有远处转移的影响。处于肿瘤发病Ⅲ～Ⅳ期的患者其血清IL27水平低于Ⅰ～Ⅱ期患者；合并远处转移的患者血清IL27水平低于无远处转移的患者。见表4。
3讨论
骨肉瘤的发生与进展取决于机体自身的免疫状态。IL10是参与肿瘤微环境内介导免疫抑制的重要细胞因子[7]，通过免疫抑制作用，能够中和体内过强的免疫反应。IL10通过抑制IL1、IFNγ、TNFα等促炎因子的分泌来达到抑制炎症反应的目的。同时，IL10也通过下调抗原提呈细胞（APC）来反馈调节效应T细胞[8]。IL10不仅能够发挥重要的免疫抑制作用，同时也能刺激免疫作用[9]。IL27是新近发现的 IL6/IL12家族的细胞因子，主要由活化的抗原提呈细胞（包括单核巨噬细胞和树突状细胞）产生，通过与其受体IL27R （WSX1/gp130）结合发挥生物学功能[10]。研究发现，IL27具有抗肿瘤活性，能够抑制血管的生成和促进肿瘤细胞的凋亡，在抗肿瘤免疫以及以Th1型免疫主导的病理过程中发挥重要作用[11]。既往的研究已表明IL27参与了多种机体肿瘤的发生与进展，如与前列腺癌及其骨转移、食管癌淋巴转移、黑色素瘤等肿瘤密切相关[12]，IL27无论对原发或者继发性肿瘤均有抑制作用，这使它成为低免疫源性肿瘤治疗潜在的新靶点。
本研究发现，骨肉瘤患者与健康人群相比，血清IL27表达明显下降。提示低表达的IL27水平可能导致Th1细胞毒性反应减弱进而导致骨肉瘤的发生。同时我们探讨了血清IL27水平与骨肉瘤患者各临床特征的相关性，结果显示IL27水平并不与骨肉瘤患者的年龄、性别、瘤体大小及部位相关。临床分期为Ⅲ～Ⅳ期的患者和发生远处转移的患者血清IL27均呈现显著的低水平，提示血清IL27水平下降可能与骨肉瘤的进展相关，可能的机制如下：（1）特异性 CD8+T细胞通过IL27调节参与机体抗肿瘤或者在活体直接起到抗肿瘤增殖作用[13]。（2）血管形成作用和NK细胞被IL27抑制，从而抑制了肿瘤生长和转移。因此IL27可能是一种潜在的抗肿瘤细胞因子，其主要通过 CD8+T细胞，分泌IFNγ发挥抗肿瘤作用，对免疫原性高低不同的肿瘤细胞发挥抑制肿瘤生长和转移作用，尤其对免疫原性低的肿瘤发挥无可比拟的作用[14]，其可以通过抑制血管形成来抑制肿瘤的增殖。
本研究发现，骨肉瘤患者与健康人群相比，血清IL10表达下降，考虑为：（1）IL27对IL10的分子调节机制作用。有研究表明IL27可通过诱导cMaf的表达来促进细胞因子IL21的产生和上调诱导共刺激分子（ICOS）的表达，从而诱导分泌IL10的Tr1细胞的分化和增殖[15]。在骨肉瘤环境下IL27可能对IL10有调节作用。（2）肿瘤微环境中IL10对免疫应答的负向调节作用。（3）IL10通过APC发挥免疫抑制。而本研究发现IL27与IL10无相关性，考虑两者在骨肉瘤表达中各自有其表达的机制，IL27与IL10在本次研究均下降，彼此有一定的联系，但具体机制尚不明确。
本次研究也存在着一些局限性。第一，本次研究的样本数相对较小，可能会影响统计的效能。第二，样本来源于特定的地区，拥有自身独特的遗传背景，因此，本研究结论可能并不一定适用于其他地区与种族的人群。第三，本研究骨肉瘤患者的选取是以医院为基础，对照组则来源于广大社区，实验设计为病例对照设计而非随机设计，可能会存在选择偏倚。因此，未来我们将展开更大样本及多民族广泛参与的实验研究，进一步探讨IL27、IL10与骨肉瘤发病风险的关系。
总之，骨肉瘤患者机体存在免疫调节失衡，IL10及IL27参与其中，它们的表达异常与骨肉瘤的发生密切相关，可能在骨肉瘤患者抗肿瘤免疫中发挥重要作用，随着对骨肉瘤发生及进展研究的深入，血清IL10及IL27表达水平的检测也有望成为骨肉瘤诊断、治疗及判断疗效预后的重要参考指标。
参考文献
[1]He JP，Hao Y，Wang XL，et al.Review of the molecular pathogenesis of osteosarcoma[J].Asian Pac J Cancer Prev，2014， 15（15）：59675976.
[2]Luetke A，Meyers PA，Lewis I，et al.Osteosarcoma treatmentwhere do we stand？ A state of the art review[J].Cancer Treat Rev，2014，40（4）：523532.
[3]Bai SB，Chen HX，Bao YX，et al.Predictive impact of common variations in DNA repair genes on clinical outcome of osteosarcoma[J].Asian Pac J Cancer Prev，2013，14（6）：36773680.
[4]Boerman I，Selvarajah GT，Nielen M，et al.Prognostic factors in canine appendicular osteosarcomaa metaanalysis[J].BMC Vet Res，2012（8）：56.
[5]Umansky V，Sevko A.Tumor microenvironment and myeloidderived suppressor cells[J].Cancer Microenviron，2013，6（2）：169177.
[6]Xiao H，Chen L，Luo G，et al.Effect of the cytokine levels in serum on osteosarcoma[J].Tumour Biol，2014，35（2）：10231028.
[7]Yi Y，He HW，Wang JX，et al.The functional impairment of HCCinfiltrating gammadelta T cells，partially mediated by regulatory T cells in a TGFbetaand IL10dependent manner[J].Journal of hepatology，2013，58（5）：977983.
[8]Li Z，Chen L，Rubinstein MP.Cancer immunotherapy：are we there yet？[J].Exp Hematol Oncol，2013，2（1）：33.
[9]Tanikawa T，Wilke CM，Kryczek I，et al.Interleukin10 ablation promotes tumor development，growth，and metastasis[J].Cancer research，2012，72（2）：420429.
[10]Tao YP，Wang WL，Li SY，et al.Associations between polymorphisms in IL12A，IL12B，IL12Rbeta1，IL27 gene and serum levels of IL12p40， IL27p28 with esophageal cancer[J].J Cancer Res Clin Oncol，2012，138（11）：18911900.
[11]Huang ZQ，Wang JL，Pan GG，et al.Association of single nucleotide polymorphisms in IL12 and IL27 genes with colorectal cancer[J].Clin Biochem，2012，45（12）：5459.
[12]Di Carlo E，Sorrentino C，Zorzoli A，et al.The antitumor potential of interleukin27 in prostate cancer[J].Oncotarget，2014，5（21）：1033210341.
[13]Peng Q，Qin X，He Y，et al.Association of IL27 gene polymorphisms and HBVrelated hepatocellular carcinoma risk in a Chinese population[J].Infect Genet Evol，2013（16）：14.
[14]Wynick C，Petes C，Gee K.Interleukin27 mediates inflammation during chronic disease[J].Interferon Cytokine Res，2014，34（10）：741749.
[15]Pot C，Jin H，Awasthi A，et al.Cutting edge：IL27 induces the transcription factor cMaf，cytokine IL21，and the costimulatory receptor ICOS that coordinately act together to promote differentiation of IL10producing Tr1 cells[J].J Immunol，2009，183（2）：797801.
（编辑：潘明志）