非病毒载体聚乙烯亚胺转基因因素的优化

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聚乙烯亚胺属于阳离子多聚物,可浓缩DNA作为转基因非病毒载体.但其转染影响变量较多,如果不能充分控制将不能得到重复的、良好的结果.这里测定了聚乙烯亚胺转基因效率的影响因素,为合成更复杂的人工转基因载体创造条件.我们通过聚乙烯亚胺转染编码β-半乳糖苷酶的pSVβ质粒到COS-7和NIH3T3细胞中,测定质粒因素、血清、细胞密度、操作方式以及转染复合物的保存因素对聚乙烯亚胺转基因效率的影响.结果表明:质粒中生物活性抑制剂明显降低转染效率,通过截流分子量3000或10000的超滤可以除去生活性抑制剂;断裂的质粒
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