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通过生物信息学分析发现，pprM基因含有冷休克DNA结合域。利用Overlap PCR方法获得pprM基因DNA结合域缺失的基因片段pprMACSD后，酶切扩增的片段和自杀质粒空载体pkl8mobsacB，并将目的基因片段与自杀质粒载体连接构建重组载体pkl8mobsacB-pprMACSD，将重组子转化大肠杆菌JM109感受态，筛选出阳性克隆，酶切及测序鉴定。成功构建pprMDNA结合域基因敲除重组体，且生物信息学分析预测结果显示pprMDNA结合域与耐辐射奇球菌抗辐射功能相关。