【摘 要】
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目的:探讨高糖诱导胰岛微血管内皮细胞株MS-1凋亡及其可能机制。方法:体外培养MS-1细胞,用含有不同浓度葡萄糖(5.6、25.0和33.6 mmol/L)的培养液分组培养12、24 h。流式细胞
【机 构】
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南京医科大学第一附属医院内分泌科,
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目的:探讨高糖诱导胰岛微血管内皮细胞株MS-1凋亡及其可能机制。方法:体外培养MS-1细胞,用含有不同浓度葡萄糖(5.6、25.0和33.6 mmol/L)的培养液分组培养12、24 h。流式细胞术分析各组细胞凋亡率变化;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组细胞增殖率变化;RT-PCR分析GRP78、CHOP、caspase-3、caspase-12 mRNA表达变化情况;Western blot分析GRP78、CHOP蛋白表达变化情况。结果:与5.6 mmol/L组相比,培养12 h及24 h后,25.0和33.6 mmol/L组MS-1细胞凋亡率显著增加(P<0.05);而细胞增殖率显著下降(P<0.05),且呈浓度和时间依赖性。进一步研究表明,在高糖刺激12 h及24 h后,cas-pase-3、caspase-12 mRNA表达显著上调(P<0.05),CHOP mRNA和蛋白表达水平均显著上调(P<0.05);而GRP78 mRNA和蛋白表达水平在刺激12 h后显著上调,24 h后却显著下降(P<0.05)。结论:高糖可以促进胰岛内皮细胞凋亡增加,并呈浓度和时间依赖性升高,其机制可能与启动胰岛内皮细胞内质网应激有关。
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