AtPCS1基因的原核表达及多抗血清的制备

来源 :兰州大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：b411574103

【摘要】

：

利用RT-PCR扩增拟南芥螯合肽合成酶（AtPCS1）基因全序列,构建原核表达载体pET28a- AtPCS1并测序.将该载体转化大肠杆菌BL21,用0.75 mmol/LIPTG诱导融合蛋白AtPCS1-His的表达,纯

【作者】

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王鸣刚赵宏刘左军吴亦亮陈亮

【机构】

：

兰州理工大学生命科学与工程学院,厦门大学生命科学学院

【出处】

：

兰州大学学报：自然科学版

【发表日期】

：

2008年2期

【关键词】

：

植物螯合肽合成酶原核表达融合蛋白抗血清 phytochelatin synthase prokaryotic expression fusing prot

【基金项目】

：

甘肃省自然科学基金（3ZS042-B25-011）,兰州理工大学博士基金（sB08200602）和甘肃省教育厅研究生导师基金（0703-11）资助.

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利用RT-PCR扩增拟南芥螯合肽合成酶（AtPCS1）基因全序列,构建原核表达载体pET28a- AtPCS1并测序.将该载体转化大肠杆菌BL21,用0.75 mmol/LIPTG诱导融合蛋白AtPCS1-His的表达,纯化该融合蛋白.用纯化的融合蛋白免疫小鼠,ELISA法测定抗血清的效价可达1：2 000.抗血清与融合蛋白及拟南芥总蛋白的western-blot结果表明：制备的抗血清具有较高的活性和特异性.

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