【摘 要】
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目的扩增华支睾吸虫(Cs)一个编码谷胱甘肽转移酶(GST)的新基因,确认是否存在内含子,进行原核表达,纯化.方法用PCR方法从成虫cDNA文库和基因组中扩增CsGST基因,测序,定向克隆
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目的扩增华支睾吸虫(Cs)一个编码谷胱甘肽转移酶(GST)的新基因,确认是否存在内含子,进行原核表达,纯化.方法用PCR方法从成虫cDNA文库和基因组中扩增CsGST基因,测序,定向克隆到原核表达载体pET-30a(+),在大肠杆菌BL21/DE3表达,按照Ni-NTA agarose说明书纯化重组蛋白,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和薄层色谱(TLC)分析.结果 CsGST基因全长639 bp,没有内含子,构建的原核表达质粒pET-30a(+)-CsGST在大肠杆菌中得到了有效
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