【摘 要】
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采用PCR方法从里氏木霉(Trichoderma reesei)基因组中获得含有两个内含子的内切-β-甘露聚糖酶全长基因,末端重叠延伸PCR去除内含子后,将其插入到巴斯德毕赤酵母(Picher past
【机 构】
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中国科学院微生物研究所微生物资源国家重点实验室
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采用PCR方法从里氏木霉(Trichoderma reesei)基因组中获得含有两个内含子的内切-β-甘露聚糖酶全长基因,末端重叠延伸PCR去除内含子后,将其插入到巴斯德毕赤酵母(Picher pastoris)表达载体pPIC9K中,位于α-因子信号肽序列的下游,并与之同框,获得重组质粒pM242.重组质粒线性化后用电击法转化毕赤酵母菌株GS115.经大量筛选,获得高效分泌表达内切甘露聚糖酶的毕赤酵母工程菌株Gpmf25.摇瓶发酵结果表明,培养基中甘露聚糖酶的活力可达12.5IU/mL.重组酶最适pH和
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