人VEGF165基因的克隆、表达和活性鉴定

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目的克隆人VEGF165基因,构建其真核表达质粒,转染293细胞,并鉴定表达VEGF的生物学活性.方法采用PCR法从人心脏cDNA文库钓取人VEGF165基因,插入pUC19载体测序后与真核表达质粒pAdTrackCMV连接,阳离子脂质体Lipofectamin介导VEGF基因转染293细胞,Northern blot和Western blot法分别检测VEGFmRNA和蛋白的表达,Miles试验进行活性鉴定.结果(1)琼脂糖凝胶电泳分析得到两个片段,分别为582bp的VEGF165cDNA和2.68kb
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